【Wako】高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒

【Wako】高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒

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近年来，β-淀粉样蛋白（Aβ）寡聚体作为阿尔茨海默病因而备受瞩目。众所周知，Aβ寡聚体是Aβ单体的可溶性凝集体，会抑制神经细胞的突触功能。

Aβ寡聚体中，按照分子量的大小，可以分成低分子量的Aβ寡聚体（Low-n 寡聚体）和高分子的Aβ寡聚体（ADDL、Aβ*56、原纤维（Profibril））。

有相关的报告指出，高分子Aβ寡聚体的Aβ*56（12-mer）对记忆损伤的影响极大1），在认知功能正常的成年人中，Aβ*56比二聚体、三聚体先增加并与Tau蛋白相关，二聚体、三聚体形式的Aβ不与Tau相关2）。

1) Lesné, S., et al.: Nature, 440, 7082, 352(2006).

2) Lesné, S. E., et al.: Brain,136, 1383(2013).

试剂盒内容

96次用
抗体固相化孔板——1个
标准溶液（10 nM）——100 μL
缓冲液——60 mL
生物素偶联抗体（BAN50）溶液——100 μL
过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100 μL
显色剂1——6 mL
显色剂2——6 mL
洗涤液（10×）——100 mL
标准品制备溶液——12 mL
血浆血清用样品制备溶液——50 mL
封板贴——4张

特点

● 可检测血浆、血清、脑脊液样品
● 可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量

试剂盒功能

※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。

检测原理

本系列采取双抗体夹心法ELISA，使用抗Aβ抗体（BAN50）作为捕获抗体和检测抗体，与1~8-mer几乎不发生反应，与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应。使用带有16个抗Aβ抗体（BAN50的抗体识别序列的16-mer MAP肽作为标准品。

高分子Aβ寡聚体的特异性数据

将Aβ1-42肽冷藏并孵育过夜后，通过超滤分离为不足30 kDa（8聚体以下）和30 kDa以上（9聚体以上），并使用Aβ抗体（BAN50）对各组进行Western Blot和ELISA（本方法）检测。


8聚体以下（＜30 kDa）的Fraction B几乎检测不到信号；9聚体以上（≥30 kDa）的Fraction A则检测到强烈的信号。

检测案例

检测案例1：加标回收和稀释度线性测试



检测案例2：检测临床样品（脑脊液）
用本ELISA法检测非认知症患者（Control）、轻度认知障碍患者（MCI）阿尔茨海默病（AD）患者的脑脊液。

※3：MMSE score：认知功能诊断问诊检查的分数，30-28分：正常；27-24分：怀疑有轻度认知障碍；23分以下：怀疑严重认知症
非认知症患者（Control）、轻度认知障碍患者（MCI）阿尔茨海默病患者（AD）间的检测值差异明显。
结果表明，高分子Aβ寡聚体的检测值与MMSE Score相关。

对比表

※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。

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※ 仅供实验研究用，不可用于临床诊断。

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