【Promega】Chroma-Glo™ Luciferase Assay System
Chroma-Glo™ Luciferase Assay System
说明
Chroma-Glo™ Luciferase Assay System (Chroma-Glo™ 萤光素酶检测系统 ) 和 Chroma-Luc™ 系列载体结合使用，只需加入一种试剂就可以从一份样品中产生红色和绿色两种 ( 双色 ) 萤光。每一个Chroma-Luc™萤光素酶产生的双色萤光经滤光片过滤，可以使每个报告基因几乎同时被独立测量。Chroma-Glo™ 检测使用均质配方，Chroma-Luc™ 萤光素酶产生的每一种萤光信号的半衰期大于 30 分钟，因此可以用于处理大量平板而不需样品前处理过程。使用高度同源的 Chroma-Luc™ 萤光素酶建立理想的内对照，可以在研究细胞毒性的负调节时使结果归一化，也可减小样品内和样品间的数据变化。
还可以在细胞水平的检测中，使用两个报告基因进行叠加报告基因实验，以增加数据内容。
特点
• 加入一种底物，测量双报告基因：通过数据归一化提高精确度和准确度，或使用两个报告基因进行叠加实验检测。用滤光片在光谱上分开不同的萤光信号。
• 建立理想的对照或叠加系统：使用高度同源的红色和绿色萤光素酶来减少可能的 RNA 和蛋白质对报告基因表达的影响。
• 提高通量：发光信号更稳定，更适合于大量平板的批处理或连续处理操作。
• 较少操作步骤：在有培养基的细胞中直接加入 Chroma-Luc™试剂后就可测量。
• 可定制或批量订购：想了解更多定制此产品的信息，请浏览www.promega.com/myway/。
• 自动检测：提供经过验证的自动操作方法，www.promega.com/automethods/。
• 储存条件：将 Chroma-Glo™ 底物储存于 -20℃。将 Chroma-Glo™Assay Buffer 低于 25℃储存。
使用 Chroma-Luc™ 技术检测同一个样品中的两种独立的实验信号。含有 CRE 或NFkB 共有序列的 DNA 片段被克隆到 pCBG99-Basic (Cat.# E1431) 或 pCBR-Basic(Cat.# E1411)。由 此 生 成 的 pCRE-CBG99-luc 和 pNFkB-CBR-luc 构 造 被 共 转 染到 293 细胞中。在转染后 24 小时，细胞分别受到了三种不同的处理：ISO (1mM)/RO(100mM)，TNFa(0.1mg/ml)/RO(100mM) 或 ISO(1mM)/RO(100mM) 加 TNFa (0.1mg/ml)。对照细胞中只加入了 RO(100mM)。在处理 6 小时后，收获细胞并用 ChromaGlo™ 试剂进行检测。通过配置红色滤光片 ( 波长 610) 和绿色滤光片 (510/60)，我们可以使用 Mithras LB940 (Berthold Technologies) 检测相对光单位 (relative lightunits)。使用 Chroma-Luc™ 计算器 ( 可在 www.promega.com/chromacalc/ 下载此文件 ) 可以解读红色和绿色的信号。通过 RO 对照区分三种处理，并由此计算叠加诱导。
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