【Promega】HaloCHIP™ System
产品描述
HaloCHIP™ System 用于共价捕获（不使用抗体）细胞内蛋白：DNA 复合物。此试剂盒（括 HaloLink™ Resin、Mammalian Lysis Buffer、Wash Buffer 和 HaloCHIP™ Blocking ligand 等组分）高效且耐用性良好，可用于替代标准染色质免疫沉淀（ChIP）方法。
原理
靶蛋白（例如转录因子）以 HaloTag®融合蛋白这一形式表达于细胞内，并在存在甲醛的条件下与 DNA 发生交联，然后被 HaloLink™ Resin 捕获（共价结合）。可于严苛条件下对共价捕获物充分进行洗涤，但是使用抗体和其他非共价标签进行下拉实验时则无法在此类条件下进行洗涤。由于可于严苛条件下进行洗涤，因此检测DNA 片段的本底信号更低且信背比更大。共价捕获后，通过严苛洗涤方式除去非特异性结合的核蛋白和 DNA 并进行加热从而逆转 DNA 与 HaloTag® 标记转录因子所发生的交联，进而释放DNA以供后续分析（采用 RT-PCR 或测序技术）。
功能和优点
• 无需抗体：无需 ChIP 级抗体。
• 快速获取结果：24-48 小时内便可获取数据，实验步骤少，可将实验误差和伪影信号降至最低水平。
• 信背比更大：使用极少量细胞便可检测蛋白结合方式的细微变化
参考文件
Nagaki, K. et al. (2012) Isolation of centromeric-tandem repetitive DNA sequences by chromatin affinity purification using a HaloTag7-fused centro¬mere-specific histone H3 in tobacco. Plant Cell Rep. 31(4), 771-9.
Felder, T. et al. (2011) Characterization of novel proliferator-activated receptor gamma coactivator-1alpha (PCG-1alpha) in human liver. J. Biol. Chem. 286, 42923-36.
订购信息
名称 |
货号 |
HaloCHIP™ System |
G9410 |
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