【Promega】Nano-Glo® Endurazine™ 和 Vivazine™

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Nano- Glo® Extended Live Cell Substrates Endurazine™ 和 Vivazine™

由于会发生信号衰减，因此使用 Nano-Glo Live Cell Assay System 进行活细胞、非裂解检测的持续时长应 ≤ 2 小时。Nano-Glo Endurazine 和 Vivazine Live Cell Substrate 为 NanoLuc 和 NanoBiT 萤光素酶提供了其他活细胞检测方法，从而使得非裂解检测的持续时间达数小时至数天。

对于这两种底物而言，由于酯水解反应（由细胞酯酶催化）速率较为缓慢，因此整个实验过程中呋喃嗪释放速率均较为稳定。生成的呋喃嗪为 NanoLuc 和 NanoBiT 萤光素酶的底物

比较 Nano-Glo® Endurazine™、Vivaazine™ 底物与 Nano-Glo® Live Cell Assay System。将编码 NanoLuc® 萤光素酶的质粒（由 PGK 启动子驱动）瞬时转染至 HEK293 细胞中，并测量发光信号强度。

与 Endurazine 底物相比，Vivaazine 底物一般具有更高的明亮度，但其信号衰减速度也更快。与其他 Nano-Glo Live Cell Substrates 相比，Endurazine 底物的信号稳定性最好，但其初始信号强度较低。

比较 72 小时内 Nano-Glo® Endurazine™ 和Vivazine™信号。将编码 NanoLuc® 萤光素酶的质粒（由 HSV-TK 启动子驱动）瞬时转染至 HEK293 细胞中，并持续测量发光信号强度 72 小时。

订购信息

NanoBRET 与 NanoBiT- 哪种技术更佳？

NanoBiT 和 NanoBRET 技术均非常适用于测量蛋白与蛋白之间的相互作用，那么您该如何作出选择呢？首先应明确的是您所在实验室是否了解共振能量转移检测方法，且是否配有可检测此类相互作用的特定仪器。进行NanoBRET检测时，需使用可连续测量双滤光发光信号且配备合适滤波器的仪器。借助专用成像设备，这两种技术均可实现体内或体外成像。下表列出了这两种技术的部分异同点，从而帮助您选择最契合您实验目标的检测方法：

NanoBRET 与 NanoBiT- 相似之处

可实现活细胞动态检测

基于转染的克隆

需对标记蛋白对的 8 种可能组合形式进行测试

需于稳定细胞内表达两个蛋白伴侣

借助专用成像，均可实现生物发光成像。

NanoBRET 与 NanoBiT- 不同之处

NanoBRET	NanoBiT
需测量经滤光后的发光信号	需测量标准发光信号
必须对供体（NanoLuc 融合载体）与受体（HaloTag融合载体）比例进行优化	一般来说，进行 PPI 检测时，SmBiT 和 LgBiT 载体比值应为 1:1
由于需添加多种试剂，因此操作流程更长	由于仅需添加 1 种试剂，因此操作流程更短
为校正细胞数量差异，因此进行比值测量	测量信号增益或衰减，因为其对细胞数量差异具有较高的敏感度
基于蛋白对的接近程度。	需亚基发生物理相互作用。