【Promega】代谢物检测

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Promega J6021 J6022 J5021 J5022 J8021 J8022 J7021 J7022

由于葡萄糖代谢是细胞功能的核心，减少葡萄糖摄取或增加糖酵解的变化对细胞和生物体都有广泛影响。与多种疾病相关，如糖尿病，肿瘤，炎症等。

Promega 开发的生物发光检测分析，可以快速、灵敏和有选择性地检测包括 3D 培养模型在内的多种生物样品中的葡萄糖、乳酸、

谷氨酸和谷氨酰胺等代谢物。同时还有最新的基于 Lumit™ 免疫检测技术的胰岛素和胰高血糖素检测系统。可以更全面的解析相关的生理病理过程。

代谢物检测

■ 检测原理

代谢物特异的脱氢酶催化代谢物的氧化，同时伴随着 NAD+ 还原为 NADH。在 NADH 存在下，还原酶将萤光素前体 - 还原酶底物还原成萤光素。在萤光素酶反应中，利用萤光素酶和 ATP 检测萤光素，所发出的光信号与样品中代谢物的量成正比。

■ 产品特点

△快速灵活的样品制备

可检测包括培养基、细胞、组织和血浆 , 血清在内的多种样品类型中的代谢物。检测只需要极少的制备步骤，且不需要离心和离心柱。

△方便的分析

线性范围宽，可实现对多种浓度范围的样品进行轻松测定。

△检测微小变化

与比色和荧光检测相比，检测窗口更宽 (S/Bmax>100), 可更好地区分代谢物水平的微小变化。

△从每个样品中获取更多信息

可实现从同一样品中检测多种代谢物。并且可联合应用细胞活力检测进行多重检测，更便于均一化处理。

△满足高通量和流程化工作需求 : 可轻松兼容 384 孔板通量检测

■ 产品参数列表

■ 从一个样品中检测多个代谢物

分别使用 Glucose-Glo™, Lactate-Glo™, Glutamine/Glutamate-Glo™ 和 Glutamate-Glo™ 同时检测对细胞能量状态非常重要的四种代谢物：葡萄糖、乳酸盐、谷氨酸盐和谷氨酰胺。以上代谢物检测产品可测的样品类型包括培养基、血清、血浆和组织。以下数据是从来自相同细胞培养孔的培养基样品中检测 4 种不同的代谢物而得到的，详情请参考技术手册TM494。

■监控培养基中的营养物消耗和代谢物分泌

下图：监控细胞培养基中的代谢物可以为细胞代谢途径中发生的变化提供信息。葡萄糖消耗和乳酸分泌可作为糖酵解的指标，而谷氨酸的分泌可提供谷氨酰胺分解的信息。通过检测少量经过稀释的培养基，可监控代谢物随时间发生的变化或处理后（比如暴露于缺氧条件）的变化。

下图：缺氧诱导的代谢变化。两种不同的乳腺癌细胞系对缺氧条件（1%氧气）的反应不同。MCF7 细胞转变为糖酵解程度更高的表型伴随乳酸分泌增加，而原本糖酵解程度高的 MDA-MB-231 细胞系则没有观察到明显变化。

下图：细胞依赖性谷氨酰胺代谢。两种有着不同的谷氨酰胺需求的卵巢癌细胞系表现出不同的谷氨酰胺消耗和谷氨酸分泌的模式。将SKOV-3 或 OVCAR-3 细胞接种在 96 孔板中，接种密度为 10,000 个细胞 / 孔。在指定的时间点，取 2μl 培养基，稀释并测定。OVCAR-3细胞的谷氨酸分泌 / 谷氨酰胺消耗的比例较低（~0.17 vs. ~0.42）。